二氧化碳既是細胞的代謝產物，是細胞生長的必需成分，又與維持培養液的pH有關。二氧化碳既是細胞的代謝產物，是細胞生長的必需成分，又與維持培養液的pH有關。
    大多數細胞適宜的pH范圍往往是7.2—7.4。CO2既是細胞代謝產物也是細胞所需成分，主要與維持培養液的pH有直接關系。動物細胞多數需要微堿性環境，pH為7.4左右。在細胞培養過程中，隨著CO2釋放量的增多，培養基會變酸，因此常加入NaHCO3來調節pH。NaHCO3具有釋放CO2的傾向，加入CO2可以抑制這個反應的進行。養箱中CO2濃度應與培養液中NaHCO3濃度相平衡，在細胞培養中，以5%的二氧化碳氣體比例為宜。

細胞培養其他必須的因素：
1、無毒和無菌是體外培養細胞的首要條件。為保證細胞能在體外環境中生長繁殖，必須要確保無菌工作區域。
2、合適的溫度：一般哺乳類與禽類細胞在體外培養的適宜溫度是37℃，不適宜的環境溫度會影響細胞的生長。
3、適宜的滲透壓：高滲溶液或低滲溶液會引起細胞發生褶皺、腫脹、破裂。